400號美國國道（U.S. Route 400，縮寫US 400），是一條主要為東—西向的美國國道，全長481.306英里（774.587公里），於1994年完工啟用。該道路的西部端點位於科羅拉多州格拉納達的385號美國國道路口，東部端點位於密蘇里州喬普林（英语：Joplin, Missouri）西南方，靠近洛馬琳達（英语：Loma Linda, Missouri）的44號州際公路交流道，最終路段與166號美國國道（英语：U.S. Route 166）共線。400號美國國道西側原本止於堪薩斯州花園城（英语：Garden City, Kansas），1996年才延伸至目前的端點。
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| 道路信息 | |
| 管理方 | 科羅拉多州運輸局[*]、堪薩斯州運輸部[*]、密蘇里州交通部[*] |
| 道路總長 | 481.306英里（774.587公里） |
| 启用时间 | 1994 |
| 公路系統 | |
