RIPA裂解液

RIPA裂解液(英語:Radioimmunoprecipitation assay buffer,全称放射免疫沉淀法缓冲液)是一种用于裂解细胞或组织的裂解缓冲液英语Lysis_buffer,常用于放射性免疫沉淀分析(RIPA)[1][2]。此缓冲液的变性性能比NP-40裂解液英语Nonidet P-40曲拉通X-100裂解缓冲液更强,因为它包含离子型去垢剂SDS脱氧胆酸钠作为破坏核膜,提取核内物质的活性成分。RIPA缓冲液在实验时能提供低的背景,但也会使激酶变性。

配方

用于提取总蛋白质的RIPA缓冲液配方如下:

  • 25mM Tris (也可以用10mM 磷酸缓冲液来代替)pH值为7-8
  • 150mM 氯化钠
  • 0.1% SDS(可选)
  • 0.5%的 脱氧胆酸钠
  • 1%的Triton X-100或 NP-40
  • 蛋白酶抑制剂,例如苯甲基磺酰氟(PMSF)或其它蛋白酶抑制剂(根据试剂商提供的说明使用)。

参考文献