莫耳吸光度
莫耳消光係數,又稱莫耳吸光係數,是衡量化學物種吸收特定波長光強度的度量單位。此為物質的固有性質。根據比爾-朗伯定律,A = εcl,試樣的實際吸光度A,與光徑長l、物質濃度c有關。ε的單位通常是M-1cm-1或L mol-1cm-1。因為1公升合1000cm3,有時1000倍大的數值在舊表示法中常使用cm2mol-1。
在生物化學裡,蛋白質在280nm的消光係數幾乎全由芳香族殘基,尤其是色胺酸所決定,可由胺基酸序列預測。[1] 若消光係數已知,可以決定溶液中蛋白質濃度。
另一個消光係數的度量單位是E1%,稱為質量消光係數。E1%是1%質量百分濃度溶液的吸光度,單位為dag-1L cm-1。ε和E1%的換算可使用下列公式:ε = ((E1%/10)*分子量)
當溶液中含超過一種吸光物種,總吸光度為個別物質(X,Y等)吸光度的總和:
N種成分的混合物組成可藉測量N個波長N個波長的吸光度找出(個別化合物在這些波長的ε值須已知),選定的波長通常是個別化合物最大吸收(吸光度峰值)的波長。任意波長不必是任一對物質的等消光點。N種成分的濃度ci和波長λi、吸光度A(λi)可求得:
這組聯立方程式可求解以導出個別吸光物種的濃度。
莫耳消光係數ε與吸收截面直接相關:
單位為cm2。 [2]
參見
- ^ Gill, SC; von Hippel, PH, Calculation of protein extinction coefficients from amino acid sequence data, Analytical Biochemistry, 1989, 182 (2): 319–26
- ^ Lakowicz, Joseph R, Principles of Fluorescence Spectroscopy 3rd, New York: Springer Science+Businss Media, LLC: 59, 2006