400号美国国道（U.S. Route 400，缩写US 400），是一条主要为东—西向的美国国道，全长481.306英里（774.587千米），于1994年完工启用。该道路的西部端点位于科罗拉多州格拉纳达的385号美国国道路口，东部端点位于密苏里州乔普林（英语：Joplin, Missouri）西南方，靠近洛马琳达（英语：Loma Linda, Missouri）的44号州际公路交流道，最终路段与166号美国国道（英语：U.S. Route 166）共线。400号美国国道西侧原本止于堪萨斯州花园城（英语：Garden City, Kansas），1996年才延伸至目前的端点。
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| 道路信息 | |
| 管理方 | 科罗拉多州运输局[*]、堪萨斯州运输部[*]、密苏里州交通部[*] |
| 道路总长 | 481.306英里（774.587公里） |
| 启用时间 | 1994 |
| 公路系统 | |
