水解酶(英語:Hydrolase)是一種催化化學鍵的水解的酶。舉例來說,一種酶催化以下的化學反應就是水解酶:
水解酶是以「(底物)水解酶」這種格式來命名。但是,一般的名稱卻是「(底物)酶」,例如核酸酶就是一種水解酶分解核酸。
水解酶在EC編號中分類為EC 3,並以它分解的鍵再細分為幾個子類: