TE緩衝液
TE緩衝液(英語:TE buffer)是分子生物學中常用的緩衝溶液,尤其是涉及到DNA、cDNA或RNA的步驟中。「TE」這個單詞得名於其組分:Tris(常用的 pH緩衝液)及EDTA(用於螯合如Mg2+等陽離子的分子)。使用TE溶液的目的是:在溶解DNA或RNA的同時保護其不被降解。
配方
配製1×TE緩衝液的典型配方是:
TE緩衝液通常被稱為T10E1緩衝液,讀成「T十E一緩衝液」。如需配製100 mL的T10E1緩衝液,只需加入1 mL的1 M Tris-HCl(pH 8.0)和0.2 mL的EDTA(0.5 M)以雙蒸水定容到100mL即可。
基於1980年代對核酸酶的研究,對於RNA來說pH通常調到7.5,而DNA通常調到8.0[來源請求]。相應的DNA及RNA核酸酶在這些pH值下活性較低,但pH=8.0時對於儲存DNA及RNA來說都很安全[來源請求]。
EDTA通過結合酶所需的金屬陽離子的方式進一步抑制核酸酶的活性[來源請求]。
基因組及質體DNA可在4℃下短期儲存於TE緩衝液之中,或在-20℃~-80℃下長期儲存並應避免反覆凍融[1]。
參考文獻
ph7.4 TE buffer=100mM/L Tris(pH7.4)+10mM/L EDTA(pH8.0) from Molecular Cloning: A Laboratory Manual
- ^ Ross, K S; Haites, N E; Kelly, K F. Repeated freezing and thawing of peripheral blood and DNA in suspension: effects on DNA yield and integrity.. Journal of Medical Genetics. 1990-09-01, 27 (9): 569–570. ISSN 1468-6244. PMC 1017219 . PMID 2231649. doi:10.1136/jmg.27.9.569 (英語).
外部連結
- OpenWetWare: TE buffer. [July 2, 2006]. (原始內容存檔於2013-09-26).
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