凯氏定氮法

凯氏定氮法（英語：Kjeldahl method，全称凯耶达尔定氮法，简称凯氮法）是分析化学中一种常用的确定有机化合物中氮含量的检测方法。这种方法是由凯耶达尔在1883年发明的。

装置图

方法

将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。在这一步中，经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点（从337℃到373℃）。样本的分解过程的终点很好判断，因为这时混合物会变得无色且透明（开始时很暗）。

在得到的溶液中加入少量氢氧化钠，然后蒸馏。这一步会将铵盐转化成氨。而总氨量（由样本的含氮量直接决定）会由反滴定法确定：冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反应，而过量的酸则会在甲基橙的指示下用碳酸钠滴定。滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。

通过凯氏定氮法测得的含氮量一般被称作总凯氮量。总凯氮量有时并不能真正地反映样本中的蛋白质含量，因为所测定的部分含氮量可能不是由蛋白质转化来的。

样本的分解： 蛋白质 + H₂SO₄ → (NH₄)₂SO₄(aq) + CO₂(g) + SO₂(g) + H₂O(g)

铵盐的分解： (NH₄)₂SO₄(aq) + 2NaOH → Na₂SO₄(aq) + 2H₂O(l) + 2NH₃(g)

氨的固定： H₃BO₄ + NH₃ → NH₄H₂BO₄

反滴定： NH₄H₂BO₄ + HCl → NH₄Cl + H₂BO₄+H⁺

如今，凯氏定氮法已经可以自动化进行，一些催化剂（如氧化汞或硫酸铜）也被使用来提高反应速率。

转换因子

转换因子是通过凯氏定氮法测得的氮换算为蛋白质的系数。理想状态下的蛋白质中的氮含量约为16%，所以测量值乘以6.25即为蛋白质量。下表为总结出的转换因子数值。

样本	转换因子
乳制品	6.38
面粉	5.70
玉米、高粱	6.24
花生	5.46
大米	5.95
大豆	5.71
肉	6.25
大麦、小米、燕麦、裸麦	5.83
芝麻、向日葵	5.30

应用

凯氏定氮法的普遍适用性、精确性和可重复性已经得到了国际的广泛认可。它已经被确定为检测食品中蛋白质含量的标准方法。但是，这种方法并不能给出真实的蛋白质含量，因为所测定的氮可能不仅仅是由蛋白质转化来的。这可以从2007年美国宠物食品污染事件和2008年中国毒奶粉事件等食品安全事件中被体现：三聚氰胺，一种含氮量较高的物质，被添加到了食品中以伪造较高的含氮量。另外，由于不同的氨基酸序列，这种方法也需要许多不同的校正因子。而且，凯氏定氮法还需要使用浓硫酸和较长时间的加热（一般来讲，大于1小时）。这也造成了在粗略测量蛋白质含量时，杜马法有时更方便些。

参见

• 总凯氮量

外部链接

1. 凯氏定氮法仪器信息1（页面存档备份，存于互联网档案馆）
2. 凯氏定氮法仪器信息2
3. 凯氏定氮法仪器信息3
4. 凯氏定氮法仪器信息4
5. 凯氏定氮法仪器信息5
6. 凯氏定氮法仪器信息6