用户:Catfaster/沙盒

图像外观

相衬显微镜现实的图片的特征是灰色的背景上面可以显示出明暗的样品结构。明暗的边缘表示了样品光学密度的变化，例如细胞和水的边界，这通常表现为在暗的物体周围会有明亮的光晕。

• 用于产生纸巾样品对比度的透射技术比较。1.559微米/像素。
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  相衬照明，样品的对比度来自穿过样品中不同长度光路的光线的相干。
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  亮场照明，样品的对比度来自对样品不同部位对光线的吸收。
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  偏光显微技术，样品的对比度来自样品不同部位对偏振光的不同旋转程度。
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  暗场照明，样品的对比度来自样品散射的光线。

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  未染色的洋葱根尖细胞涂片，徕卡HiPlan 100x/1.25 oil Ph3相衬物镜拍摄，左图使用ph3相衬光阑照明，右图使用明场照明。
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  透过T25细胞培养瓶拍摄的HeLa细胞

自商品纳豆中提取的纳豆菌。左图为TSA平板培养基上生长的菌落，右图为经孔雀石绿-番红染色的芽孢（绿色）和营养态（红色）菌体

技术优缺点

在倒置显微镜上进行活细胞观察，使用ph2相衬光阑和x40相衬物镜，直接透过塑料细胞培养瓶（T25瓶）成像，瓶中红色液体为添加了酚红和动物血清的MEM培养基，细胞贴附在底面内壁上生长，右图为看到的情形（HeLa细胞）

相对于其它对比增强技术，如DIC，相衬显微技术不使用偏振光照明，因而可以观察双折射介质，如透过塑料培养瓶或培养皿进行活细胞观察，这在细胞学研究上特别有用。如和落射荧光（EPI）技术连用，相衬物镜可以透过70%的激发光，优于其它反差增强技术（相位板产生部分衰减），所以相衬往往作为辅助成像功能出现在荧光显微镜上。此外，相衬套件的采购价位相对较低，使用调整也较为简单。

相衬显微技术存在一些固有的不足。由于在聚光镜中使用环形光阑，启用相衬照明时聚光镜的数值孔径有所限制，所以轴向分辨率较低。另外，标本和背景折射率差异较大的分界处会出现明显的光晕，导致如细胞膜、细胞器外缘等位置的细节被遮蔽。

• 未染色的洋葱根尖细胞涂片，徕卡HiPlan 100x/1.25 oil Ph3相衬物镜拍摄

测试

一些型号的相衬显微镜的聚光镜系统出厂前已经预先进行校准，因而不需要由用户进行对中操作